在生物學和醫(yī)學研究中,胎牛血清是一種極為重要的培養(yǎng)基成分,廣泛應用于細胞培養(yǎng)實驗。然而,胎牛血清的儲存和使用條件對其質量有著至關重要的影響。本文將探討為什么解凍后的胎牛血清不宜在2-8℃存放過久,并介紹正確的儲存和使用方法。
胎牛血清的儲存條件
未拆封的胎牛血清應儲存在-10℃至-20℃的溫度下,這是為了長期保持其穩(wěn)定性和質量。在這一溫度范圍內,血清中的各種蛋白和脂蛋白能夠保持其天然狀態(tài),避免發(fā)生變性或沉淀。如果儲存溫度過高,血清中的蛋白質容易變性,而溫度過低(如-80℃)則可能導致瓶子破裂,從而污染血清。
解凍過程中的注意事項
解凍胎牛血清時,應該遵循逐步解凍的原則。首先,將血清從冷凍箱中取出,置于2-8℃冰箱中融解,然后在室溫下使其融化。在整個解凍過程中,必須規(guī)則地搖晃均勻,以確保血清的溫度和成分均勻一致,減少沉淀的發(fā)生。
2-8℃存放過久的后果
雖然2-8℃是許多生物樣本的常規(guī)儲存溫度,但對于解凍后的胎牛血清來說,這一溫度并不適宜長期存放。實驗表明,長時間在2-8℃儲存的血清,其中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能會聚集而形成沉淀或可見的混濁。這些沉淀物不僅影響血清的透明度,還可能影響其在細胞培養(yǎng)中的效果。
此外,血清中的一些營養(yǎng)成分在解凍后就開始降解,如果長時間在2-8℃存放,這些營養(yǎng)成分的降解速度會加快,進一步影響血清的質量。因此,解凍后的胎牛血清應該盡快使用,避免在2-8℃存放過久。
正確的使用建議
為了確保胎牛血清的質量和效果,建議按照以下步驟使用:
解凍:按照逐步解凍法,將血清從-20℃或更低溫度取出,先在2-8℃冰箱中融解,然后在室溫下使其融化,并規(guī)則地搖晃均勻。
分裝:如果一次無法用完一瓶血清,建議無菌分裝至恰當大小的滅菌容器內,再放回-20℃冷凍保存。這樣可以有效避免反復凍融對血清質量的影響。
使用:配制完培養(yǎng)基后,應盡快使用。已經(jīng)配制了血清及抗生素的新鮮培養(yǎng)液,最好在兩周內用完,以避免營養(yǎng)成分的降解。
解凍后的胎牛血清不宜在2-8℃存放過久,因為長時間在這一溫度下儲存會導致血清中的蛋白和脂蛋白聚集形成沉淀,同時加速營養(yǎng)成分的降解。為了確保血清的質量和效果,應該遵循正確的儲存和使用方法,包括逐步解凍、無菌分裝和盡快使用。只有這樣,才能保障細胞培養(yǎng)實驗的準確性和穩(wěn)定性。