胎牛血清是采自5-8個月胎齡牛胚胎中的胎血。此時胎牛各臟器正處生長分化階段,血中含有豐富的生長發(fā)育因子,非常適合各種細(xì)胞的培養(yǎng),一旦胚胎發(fā)育結(jié)束這些因子自動消失。因此8個月胎齡以上的牛胚胎,已接近足月,不能作為胎牛血清的原料來使用。因此,胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)過程中,重要的原料。
養(yǎng)干細(xì)胞時,干細(xì)胞對內(nèi)毒素非常敏感,如果血清中內(nèi)毒素≥3EU/ml時,干細(xì)胞很容易死亡。因此,胎牛血清質(zhì)量的高低,直接影響干細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果的好壞。
間充質(zhì)干細(xì)胞作為一類特殊類型的干細(xì)胞,是干細(xì)胞藥物研究中備受關(guān)注的一類干細(xì)胞,在所有干細(xì)胞藥物研發(fā)中占比較高。盡管干細(xì)胞的無血清培養(yǎng)基更符合臨床應(yīng)用的需求,但是考慮制備成本和細(xì)胞擴增效率等因素,目前大多數(shù)人h UCMSCs仍采用胎牛血清進(jìn)行培養(yǎng),胎牛血清中含有大量維持細(xì)胞生長的因子、維生素和化合物等。研究表明,間充質(zhì)干細(xì)胞的生長和旁分泌功能受到培養(yǎng)微環(huán)境的影響。因此,胎牛血清作為微環(huán)境中重要的一環(huán),影響間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)。
選擇優(yōu)質(zhì)的胎牛血清,有利于得到更加可靠的實驗結(jié)果。
Ausbian進(jìn)口胎牛血清,澳洲血源,內(nèi)毒素含量低,≤3EU/ml。
將經(jīng)過初步檢測合格的很多供體胎牛的粗血清,混合在一起,在低溫條件下,經(jīng)七次加壓過濾,最后三次為0.1 µm無菌過濾處理,得到淺黃色,澄清,稍粘稠液體。同一批次血清質(zhì)量上基本無差異。不同廠家一個批次產(chǎn)量差異較大,從100升到2000升不等。批次大,更利于試驗的穩(wěn)定和連續(xù)的可參照性。
所有血清出廠前,均經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)控,每個批次附有詳細(xì)完整的《檢測報告》,包括:品名,貨號,批號,血源地,生產(chǎn)日期,保質(zhì)期,pH值、滲透壓、血紅蛋白、總蛋白、球蛋白、IgG、內(nèi)毒素、無菌檢查(細(xì)菌、真菌、支原體)、病毒檢查(如BVD、牛腺病毒、細(xì)胞病變效應(yīng)等)、促細(xì)胞生長能力、細(xì)胞毒性、BVD-1/2抗體檢查等。