胎牛血清在培養(yǎng)細胞中,重要的是利用它的活性的因子,因此,融化過程中大限度地保留因子的活性,就變得非常重要。本文締一生物為您詳細解讀胎牛血清的三步融化法。
回憶一下,細胞復蘇時,要保持細胞的活性,我們是要遵循“快融”原則還是“慢融”原則呢?快融!血清同樣如此!三步法需要兩個半小時,4℃過夜需要大約10個小時(冰箱一般設2-8℃,所以各實驗室融化時間會稍有出入)。哪個速度對保留活性更好?不言而喻!
下面,我們詳細解讀『血清的三步融化法』的步驟:
圖:剛從-28℃拿出的血清,是這個樣子的
融化血清一步
溫度:室溫
時間:100ml - 35分鐘
500ml - 90分鐘
1000ml - 100分鐘
或
溫度:15-20℃水?。ㄐ陆拥淖詠硭?4℃上下)
時間:100ml - 5分鐘
500ml - 18分鐘
1000ml - 20分鐘
圖:這是近Ausbian血清的大區(qū)經理,在天津血研所實驗室拍到的——實驗人員三步法化血清的圖片,為了節(jié)約時間,實驗人員采取的是一步20℃水浴18min的方法。(用現接的自來水放入冰凍的血清,即可達到20℃水浴的效果。一般實驗室沒有能制冷到20℃的水浴鍋)
融化血清第二步
溫度:20℃水?。ㄐ陆拥淖詠硭?4℃上下)
時間:100ml - 15分鐘
500ml - 25分鐘
1000ml - 30分鐘
圖:第二步,仍舊是新接的自來水浴,25min
融化血清第三步
溫度:37℃水浴
時間:100ml - 20分鐘
500ml - 35分鐘
1000ml - 45分鐘
第三步,將血清置于37℃水浴鍋中進行融化,大約30nmin左右,血清就*融化,可以分裝了。
圖:大家看,使用三步法融化的血清十分清亮,養(yǎng)細胞的效果也是棒棒噠。
綜上所述,您是不是已經對胎牛血清的三步融化法,有所了解。如果還有其他疑問,請咨詢締一生物/締一生物資深專家。