2009年,ISO發(fā)布了ISO/TS 11059:2009,對(duì)奶與奶制品中嗜冷假單胞菌的計(jì)數(shù)方法進(jìn)行了描述,通過該方法,能夠?qū)Ξa(chǎn)色素和不產(chǎn)色素的嗜冷假單胞菌進(jìn)行分離。該標(biāo)準(zhǔn)也適合乳業(yè)的環(huán)境樣本。
乳業(yè)在我國(guó)發(fā)展迅速,而且品種豐富,包括液體奶(包括巴氏殺菌奶,超高溫奶)、酸乳、冰淇淋、果汁果味乳、雪糕、酸乳飲料、麥乳精等。其中液體奶
占主要部分,巴氏殺菌奶又占液體奶的主要部分。在巴氏殺菌奶中,常常有低溫菌的存在。低溫菌即嗜冷菌,能在7℃以下繁殖。當(dāng)冰箱中貯存的奶超過保存期,就會(huì)造成低溫菌的大量繁殖,引起產(chǎn)品變質(zhì)。乳被低溫菌污染被認(rèn)為是影響奶保質(zhì)期的為關(guān)鍵的因素。也就是說,耐冷假單胞菌被認(rèn)為是巴氏殺菌奶為重要的菌。
ISO/TS 11059:2009即是對(duì)耐冷假單胞菌的檢測(cè)和計(jì)數(shù)。其中分離假單胞菌的培養(yǎng)基推薦的是PPA平板,在25℃孵育48h,然后計(jì)數(shù)。保留菌落總數(shù)在150以下的平板,挑取5個(gè)菌落進(jìn)行純培養(yǎng)和驗(yàn)證試驗(yàn)。
驗(yàn)證試驗(yàn)包括氧化酶試驗(yàn)和葡萄糖發(fā)酵試驗(yàn)。氧化酶試驗(yàn)可使用氧化酶反應(yīng)試紙,加樣后如為陽性,則在5秒至30秒內(nèi)試紙變?yōu)樽霞t色。葡萄糖發(fā)酵試驗(yàn)可使用葡萄糖瓊脂,HiMedia貨號(hào)是M1589,配方和ISO*一致。假單胞菌為氧化酶試驗(yàn)陽性,葡萄糖發(fā)酵陰性。不過ISO也指出,某些假單胞菌菌株也可能在瓊脂表面產(chǎn)生黃色。
PPA培養(yǎng)基也可從HiMedia購(gòu)買,貨號(hào)為M1788,品名為Penicillin and Pimaricin Pseudomonas Agar Base,配合兩個(gè)添加劑(貨號(hào)FD 264和FD 265) 一起使用。假單胞菌如需進(jìn)一步鑒定到種,可使用非發(fā)酵菌生化鑒定試劑盒(HiMedia貨號(hào)KB019),該試劑盒包含24種生化反應(yīng),可鑒定的假單胞菌有19種。
HiMedia的假單胞菌顯色培養(yǎng)基和假單胞菌分離瓊脂同樣值得注意。前者品名為HiFluoro Pseudomonas HiVeg Agar Base,貨號(hào)是MV1469。該培養(yǎng)基含有特異性熒光劑,銅綠假單胞菌裂解熒光劑,從而紫外燈下發(fā)出熒光(下圖左面)。后者(貨號(hào)為M406)含有三氯生,一種廣譜抗菌劑,但假單胞菌對(duì)其耐受,可以生長(zhǎng)。
HiMedia公司是微生物產(chǎn)品生產(chǎn)商,一直致力于微生物培養(yǎng)基和細(xì)胞培養(yǎng)基的研發(fā)和生產(chǎn),具有WHO GMP認(rèn)證、ISO9001:2008,ISO13485:2003認(rèn)證,CE認(rèn)證和FDA注冊(cè)登記。其產(chǎn)品行銷140多個(gè)國(guó)家。
締一生物作為HiMedia公司在中國(guó)的代理商,在微生物培養(yǎng)和檢測(cè)領(lǐng)域,一如既往地為您帶來的服務(wù)。