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把支原體趕出去?你可能只差一個Zell Shield®的距離!

更新時間:2017-12-06  |  點擊率:2409

為什么有些細(xì)胞實驗無法重復(fù)?
為什么有的細(xì)胞在相當(dāng)長的時間里,都養(yǎng)不到*狀態(tài)?
為什么實驗室中,超過一株以上的細(xì)胞都時好時壞?
細(xì)胞生長緩慢、細(xì)胞變形、碎片增加、懸浮細(xì)胞容易成團(tuán)、培養(yǎng)基提前變色、鏡下發(fā)現(xiàn)有小黑點……
 
如果排除了其他試劑選擇不當(dāng)、細(xì)胞株老化、細(xì)菌污染等原因,而仍有上述一種或幾種情況,則高度提示——你的細(xì)胞可能被支原體污染了!
 
 
圖. 電鏡下的支原體
 
支原體污染普遍存在
據(jù)美國數(shù)據(jù)統(tǒng)計,細(xì)胞發(fā)生支原體污染的幾率在 70% 以上。同時,由于支原體直徑很小,僅在 180nm~350nm 之間,只有通過電鏡才能看到,不易被實驗者肉眼發(fā)覺,支原體污染逐漸成為一個普遍存在的問題。
支原體污染的危害 
支原體污染是個循序的過程,普通抗生素對其無效。因此,支原體污染有多煩人,相信實驗人都領(lǐng)教過了。

 

1、細(xì)胞狀態(tài)不佳,生長速度慢,實驗無法推進(jìn)。
2、細(xì)胞內(nèi) DNA、RNA 及蛋白表達(dá)發(fā)生改變,影響實驗結(jié)果,導(dǎo)致實驗數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確,時間、經(jīng)費的浪費。
3、一株污染的細(xì)胞成為實驗室的污染源,對工作區(qū)域以及培養(yǎng)箱和液氮罐造成污染,進(jìn)而污染其他細(xì)胞,導(dǎo)致其他細(xì)胞繼發(fā)性污染,實驗受影響,數(shù)據(jù)無法重復(fù),預(yù)期結(jié)果出不來。

如何有效把支原體趕出細(xì)胞?
對于已耗費很多時間、大量擴(kuò)增起來的細(xì)胞,或經(jīng)過基因轉(zhuǎn)染、體外刺激等大量工作處理過的細(xì)胞,如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞被支原體污染了,怎么辦?由于前期工作量巨大,我們無法丟棄已有細(xì)胞。但由于價格原因,又無法使用那些昂貴試劑殺除細(xì)胞上的支原體,同時,實驗人員還需要清除細(xì)胞上的支原體污染,讓實驗得以往下推進(jìn),以zui終獲得準(zhǔn)確的實驗數(shù)據(jù)。
實驗者可選用對支原體的抑制劑,通過對細(xì)胞的前期處理,中期加藥,逐步通過 4 代左右的培養(yǎng),從而將支原體污染*清除,確保試驗順利推進(jìn),結(jié)果準(zhǔn)確。*此類試劑眾多,締一生物生物周圍的實驗人做過很多嘗試,其中效果zui確切且性價比很高的當(dāng)屬德國 Minerva 公司的 ZellShield®祛除劑。


Zell Shield®是一種即用型新型復(fù)合抗生素,副作用極低,能有效地祛除細(xì)胞培養(yǎng)支原體、細(xì)菌、真菌污染。Zell Shield®使用方法簡單,直接加入培養(yǎng)基中保護(hù)細(xì)胞。
它的原理:通過抑制支原體增殖中某種蛋白的合成,達(dá)到抑制新的支原體增殖的目的。屬復(fù)合型的新型抗生素。它廣泛適用于細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的科研和工業(yè)領(lǐng)域。

特點
1、適用范圍廣
普通細(xì)胞培養(yǎng)和原代細(xì)胞培養(yǎng)
2、無細(xì)胞毒性
目前,Zell Shield®對多種細(xì)胞系都無細(xì)胞毒性。
3、廣譜
祛除支原體效果明顯,同時對細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外的革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌、病原蟲、真菌等污染亦可有效預(yù)防。
4、操作簡便
可直接加入到預(yù)處理的培養(yǎng)基或細(xì)胞中進(jìn)行消毒。
5、穩(wěn)定性高
在細(xì)胞孵育期內(nèi),Zell Shield®始終保持穩(wěn)定的活性。
6、低耐藥風(fēng)險
精心挑選的新型復(fù)合抗生素只有極低的耐藥風(fēng)險,多種抗生素聯(lián)合使用幾乎不會產(chǎn)生耐藥突變株。

操作步驟:
 

*步:研究發(fā)現(xiàn),98% 的支原體污染發(fā)生在細(xì)胞間隙。因此,首先要把細(xì)胞消化下來,放入離心管,懸浮沖洗,離心,棄上清,反復(fù)三次。此時可將細(xì)胞上大部分的支原體去除,為進(jìn)一步加藥抑制做好準(zhǔn)備。
第二步:培養(yǎng)液中加入 1% 的 ZellShield®,細(xì)胞進(jìn)行正常培養(yǎng)。新的支原體增殖受到抑制,舊的支原體隨著細(xì)胞的換液逐步減少,通過 4 代左右的培養(yǎng),細(xì)胞中的支原體基本可被*清除。
注:使用 ZellShield®時,不需使用鏈青霉素。
此試劑價格約 2200 元/50 ml,可保證大量細(xì)胞的實驗得以順利推進(jìn)。
總之,細(xì)胞培養(yǎng)中,支原體污染發(fā)生頻繁。有時帶來的危害會造成實驗的巨大損失。應(yīng)經(jīng)常檢測和及時排除支原體污染,讓細(xì)胞在健康安全的環(huán)境下生長,為獲得準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,打下良好的基礎(chǔ)。
附:關(guān)于德國 Minerva 公司
 


Minerva Biolabs GmbH 公司是世界的微生物污染控制公司,特別是支原體和軍團(tuán)菌的技術(shù)和產(chǎn)品,在世界上遙遙。公司總部設(shè)立于德國柏林,專注微生物污染檢測與清除產(chǎn)品的研發(fā)和銷售。
締一生物生物 (Vian-saga), 是德國 Minerva 公司十年來在中國的*合作伙伴,一直被國內(nèi)生物界譽(yù)為「值得持續(xù)信賴的供貨商」。為國內(nèi)眾多科研機(jī)構(gòu)、生物藥廠提供的支原體污染祛除保障,同時,更以、可靠的*血清,為國內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)實驗室提供堅實有力的試劑支持。

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