締一生物生物專家近日從《動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展》上的一篇文章《支原體對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)污染的研究概況》(動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2013,34:112-117)看到里面有一節(jié)“支原體污染細(xì)胞的嚴(yán)重性”,特摘出如下,與大家分享支原體污染細(xì)胞的嚴(yán)重影響。
支原體zui早發(fā)現(xiàn)于1898年,1956年Robinson等從細(xì)胞培養(yǎng)物中分離出支原體,之后國(guó)內(nèi)外關(guān)于支原體污染細(xì)胞的報(bào)道屢見不鮮。它廣泛存在于自然界中,有80余種,污染細(xì)胞zui常見的支原體包括發(fā)酵支原體( M.fementans)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)、口腔支原體(M.orale)、精氨酸支原體(M.arginina)、梨支原體(M.pirum)、唾液支原體(M.salivarium)和人型支原體(M.hominis)。
支原體通常附著在細(xì)胞的表面,并影響其宿主細(xì)胞的生理、遺傳等多方面的正常功能,用這些污染后貌似正常的細(xì)胞做試驗(yàn)或生產(chǎn),將會(huì)嚴(yán)重影響結(jié)果。
1、對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖和形態(tài)的影響
細(xì)胞培養(yǎng)物被支原體污染后生長(zhǎng)減慢,且產(chǎn)生細(xì)胞病變(cytopathic effect, CPE),表現(xiàn)為細(xì)胞體積增大,碎片增多,在細(xì)胞質(zhì)中產(chǎn)生一些顆粒;細(xì)胞內(nèi)病毒繁殖受阻,使細(xì)胞形成空斑。光鏡下形成不正常密度生長(zhǎng)的單層,貼壁細(xì)胞形成“流沙樣”脫落、裂解。某些支原體可在侵入細(xì)胞8h使線粒體膨脹,繼而被破壞,細(xì)胞核萎縮呈空泡化,細(xì)胞微管解聚,培養(yǎng)瓶中細(xì)胞與細(xì)胞間隙出現(xiàn)膜狀沉積,細(xì)胞無法傳代,甚至整個(gè)細(xì)胞群體溶解。
2、對(duì)細(xì)胞代謝和功能的影響
有些被污染后的細(xì)胞,雖形態(tài)上變化不明顯,但培養(yǎng)液pH變化較大,更換培養(yǎng)液后幾小時(shí)就變酸,培養(yǎng)基中的必需氨基酸被消耗掉,如谷氨酸或核苷前體,改變細(xì)胞代謝。
支原體吸附在細(xì)胞表面,破壞細(xì)胞膜的完整性,影響細(xì)胞信號(hào)傳遞;消耗細(xì)胞的核苷庫,引起細(xì)胞染色體異常;發(fā)酵型支原體能迅速降解簡(jiǎn)單糖類,代謝產(chǎn)生的酸能改變細(xì)胞的功能;利用精氨酸的支原體則發(fā)生精氨酸效應(yīng),從而影響蛋白質(zhì)和核酸的合成、導(dǎo)致細(xì)胞的分裂和生長(zhǎng)受阻;引起細(xì)胞酶譜改變;由于支原體對(duì)細(xì)胞膜的吸附,干擾膜受體的功能,改變信號(hào)傳遞,破壞膜的完整性。在單克隆抗體制備中,骨髓瘤或雜交瘤細(xì)胞因支原體的污染而導(dǎo)致融合失敗或抗體分泌能力下降以至喪失。
3、引起染色體異常
改變?nèi)旧w組型,通常可導(dǎo)致細(xì)胞染色體斷裂、數(shù)目減少,出現(xiàn)雙著絲點(diǎn)染色體、環(huán)狀染色體等。
4、對(duì)免疫細(xì)胞產(chǎn)量的影響
支原體能影響巨噬細(xì)胞的活性,抑制干擾素的合成和降低其活性,加大了繼發(fā)感染其他細(xì)菌和病毒的幾率,同時(shí),通過植物血凝素干擾淋巴細(xì)胞的刺激、分化。
怎么樣?是不是應(yīng)該對(duì)你養(yǎng)的細(xì)胞監(jiān)測(cè)一下?支原體污染早期癥狀較清,肉眼看不出來。別讓支原體毀了你的實(shí)驗(yàn),浪費(fèi)了你的時(shí)間。要想早期預(yù)防支原體,請(qǐng)選用德國(guó)Minerva生產(chǎn)的ZellShield ?。要想監(jiān)測(cè)是否有支原體,可選用Minerva生產(chǎn)的高品質(zhì)支原體PCR監(jiān)測(cè)試劑盒“VenorGeM支原體檢測(cè)試劑盒(一步法)”(靈敏度高,特異性好),可和我們。
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